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              牛肉膏蛋白胨培養基的制備步驟

              2023-10-13 10:53 來源:上海遠慕生物試劑
              根據培養基配方的比例,將牛肉提取物,蛋白胨和NaCl準確稱入燒杯中。牛肉醬通常用玻璃棒挑出,在小燒杯或觀察杯中稱重,溶于熱水,然后倒入燒杯中。也可以將其放在稱量紙上,稱量后直接放入水中。此時,如果將其稍加加熱,牛肉糊將與稱量紙分離,然后立即將紙頁移開。蛋白胨吸濕性強,稱重時移動迅速。另外,在混合藥物時,應嚴格防止藥物混合。羊角面包用于一種藥物,或在服用一種藥物后,將其洗滌并干燥,然后稱重另一種藥物。不要在瓶子上蓋錯蓋子。
              稱重:

              根據培養基配方的比例,將牛肉提取物,蛋白胨和NaCl準確稱入燒杯中。牛肉醬通常用玻璃棒挑出,在小燒杯或觀察杯中稱重,溶于熱水,然后倒入燒杯中。也可以將其放在稱量紙上,稱量后直接放入水中。此時,如果將其稍加加熱,牛肉糊將與稱量紙分離,然后立即將紙頁移開。蛋白胨吸濕性強,稱重時移動迅速。另外,在混合藥物時,應嚴格防止藥物混合。羊角面包用于一種藥物,或在服用一種藥物后,將其洗滌并干燥,然后稱重另一種藥物。不要在瓶子上蓋錯蓋子。

              融化:

              在上述燒杯中,可以先添加少于所需量的水,用玻璃棒充分攪拌,然后在石棉網上加熱使其溶解。藥物完全溶解后,加水至所需總體積。如果準備了固體培養基,則將稱量的瓊脂放入溶解的藥物中,然后加熱使其溶解。在瓊脂溶解過程中,需要攪拌以防止瓊脂糊破壞燒杯。最后補上丟失的水。

              PH調整:

              在調節pH值之前,首先要用精密pH試紙測量培養基的原始pH值。如果pH呈酸性,則用滴管將1mol / L NaOH滴加到培養基中,邊攪拌邊添加,并隨時用pH試紙測量其pH值直至pH達到7.6。否則,請使用1mol / L HCl進行調整。請注意,不應將pH值調節得太遠,以免發生回調,否則會影響介質中離子的濃度。

              對于某些需要更準確pH值的微生物,可以使用酸度計調節pH值(有關用法,請參閱相關說明)。

              過濾器:

              趁熱時,用濾紙或多層紗布過濾以利于觀察結果。如果沒有特殊要求,則可以省略此步驟(此實驗中無需過濾)。

              包裝:

              根據實驗要求,所制備的培養基可以分為試管或錐形瓶。

              在填充過程中,請注意不要讓培養基粘附在試管或瓶子的嘴上,以免污染棉塞并造成污染。

              (1)液體包裝和包裝的高度優選為試管的高度的約1/4。

              (2)用于固體分裝和分裝的試管不得超過試管高度的1/5。滅菌后,應將其制成斜坡。分開的錐形瓶的體積不應超過錐形瓶的一半。

              (3)半固體分裝試管通常適合試管高度的1/3,并在滅菌后垂直凝結。

              加塞:

              填充培養基后,將棉塞放在試管或三角瓶的嘴上,以防止外部微生物進入培養基并造成污染,并確保良好的通風性能(將棉塞的方法固定在背面此實驗)。

              繃帶:

              堵塞后,將所有試管用麻繩綁起來,然后在衛生棉條上纏上一層牛皮紙,以防止滅菌過程中的冷凝水弄濕衛生棉條。使用標記指示介質名稱,組和日期。塞子裝滿牛皮紙后,用麻繩將繩子包裹成松散的結。使用時很容易解開它。另外,使用標記指示介質名稱,組和日期。

              殺菌:

              通過在121.3℃下以1.05kg / cm 2(15lb / in 2)高壓滅菌20分鐘,將上述培養基滅菌。如果由于特殊情況不能及時消毒,應將其放在冰箱中暫時存放。

              擱置斜面:

              將滅菌后的試管培養基冷卻至約50℃,將試管的棉塞端置于玻璃棒上,傾斜面的長度優選為試驗總長度的一半以下。

              無菌檢查:

              將滅菌后的培養基放入37℃的溫室中24-48小時,以檢查滅菌是否完成。
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